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压力对小梁细胞表达ZO-1和GRP78的影响           ★★★
压力对小梁细胞表达ZO-1和GRP78的影响
作者:杨雪娇 文章来源:中山大学中山眼科中心 点击数:299 更新时间:2011/9/13
目的 探索压力作用下,小梁细胞中紧密连接蛋白ZO-1和热休克蛋白GRP78表达的改变及其对ZO-1分布的影响。明确压力对小梁细胞的病理作用,为探索青光眼发病机制及进展提供新思路;
方法 (1).体外培养永生化正常人小梁细胞(iHTM)和青光眼患者小梁细胞系(GTM3);(2).分为对照组(传统培养箱培养)和压力组(60mmHg压力培养系统培养),培养8h,12h,24h;(3).倒置显微镜观察细胞形态学改变;(4).Western Blot检测压力下细胞ZO-1和GRP78蛋白表达的改变;(5).免疫荧光显微镜和共聚焦显微镜观察压力对两种细胞ZO-1分布的影响;
结果 (1).压力作用各时间点观察细胞,无明显形态改变;(2). Western blot示压力使iHTM 和GTM3 ZO-1表达减少,而GTM3减少更明显;(3).免疫荧光和共聚焦显微镜示压力破坏两种细胞ZO-1的正常分布;(4).Western blot示压力作用后8h小梁细胞表达GRP78增多;
结论 (1).压力使小梁细胞表达ZO-1 减少,同时破坏了小梁细胞规则的ZO-1 分布,与其他研究中青光眼患者房水中ZO-1增多相一致;(2). GRP78表达增多表明压力可诱发小梁细胞内质网应激反应;(3).压力使小梁细胞ZO-1和GRP78表达的改变,提示高眼压导致连接蛋白减少和分布异常及内质网应激可能与青光眼患者中小梁细胞减少有关,为探索压力与青光眼发病机制及疾病进展的关系提供新思路。
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