| 目的：探讨PDGF和VEGF抗体对体外培养人视网膜色素上皮细胞（human retinal pigment epithelium, RPE）增生的影响。方法：体外培养hRPE并传至第三代用于实验，分为对照组和不同浓度PDGF和VEGF抗体实验组。采用生长曲线法及MTT比色法检测PDGF和VEGF抗体对RPE细胞增殖的影响，并用流式细胞术检测细胞周期的变化，透射电镜观察抗体作用后细胞超微结构变化。结果：生长曲线法及MTT比色法检测表明0.001µg/ml的PDGF抗体对hRPE细胞有轻度促增生作用，0.005µg/ml、0.01µg/ml、0.05µg/ml、0.1µg/ml的PDGF抗体对细胞有抑制作用，作用5天抑制率分别为12.55%、43.72%、55.1%、55.1%，在一定浓度范围内PDGF抗体对细胞的抑制具有剂量依赖效应。0.0001µg/ml、0.0005µg/ml、0.001µg/ml、0.005µg/ml的VEGF抗体作用3天对RPE细胞的抑制率分别为19.65%、21.97%、32.9%、30.06%。台盼蓝染色检测细胞存活率：测定各组细胞活力，均大于90%。流式细胞仪检测结果示：加入终浓度为0.05µg/ml的PDGF抗体作用120小时，和正常细胞进行比较其细胞周期的变化，细胞明显阻滞于G2/M期，可见凋亡指数明显增加。加入终浓度为0.001µg/ml的PDGF抗体作用72小时，细胞明显阻滞于S期，可见凋亡指数明显增加。透射电镜结果显示：0.05µg/ml的PDGF抗体作用72h电镜下可见细胞膜破损，核空化，胞质空化，线粒体空化明显，可见核内包含体。0.001µg/ml的VEGF抗体作用72h电镜下可见核不规则形，线粒体空化，胞质空化，核染色质轻度趋边凝聚，有早期调亡的改变。结论：PDGF抗体和VEGF抗体对hRPE细胞的增生有明显的抑制作用，在一定范围内随着抗体浓度的增大PDGF和VEGF抗体对hRPE细胞增生的抑制作用逐渐加强。PDGF和VEGF抗体对RPE细胞增生的抑制作用主要是依赖于诱导细胞的调亡，而不是促使细胞变性坏死，作用性质比较温和。PDGF抗体主要将细胞阻滞于G2/M期，同时还伴随诱导RPE细胞的调亡。VEGF抗体主要将细胞阻滞于S期，同时也可以诱导细胞的调亡。 |
