| 【1】质谱分析法鉴定早期被地塞米松攻击的大鼠晶状体蛋白质【2】孙礼华，严宏，王永强【3】第四军医大学唐都医院眼科 陕西省西安市灞桥区新寺路 710038【4】目的在前期关于地塞米松激素性白内障研究结果的基础上，利用质谱分析法分离与鉴定早期被地塞米松攻击的大鼠晶状体蛋白质【5】方法2月龄雌性大鼠晶状体50个，随机分为实验组与DMEM+地塞米松培养液（10 μM）孵育组，在相同条件下孵育3 d，去除晶状体囊膜后匀浆，凝胶过滤层析分离水溶性蛋白质，测量收集的晶状体蛋白质组份280nm 的光吸收值，绘制洗脱图。蛋白质收集液透析除盐后冻干，进行双向电泳（等电聚焦电泳+SDS-PAGE）分离和鉴定该蛋白质组份，并对两组存在差异的晶状体蛋白质进一步进行MALDI-TOF肽质谱指纹图分析，以期确定早期被地塞米松攻击的晶状体蛋白质，并试图找到地塞米松与晶状体蛋白质的结合位点【6】结果双向电泳显示实验组较对照组相蛋白质条带增多，提示有较多的蛋白质聚合物或交联物形成。MALDI-TOF肽质谱指纹图分析提示地塞米松攻击的主要蛋白质是αA-晶状体蛋白。未能找出α-晶状体蛋白与地塞米松结合的位点【7】结论早期地塞米松攻击的晶状体蛋白质主要是αA-晶状体蛋白。α-晶状体蛋白被地塞米松修饰而导致其功能的降低，可能在激素性白内障的发病机制中起重要作用。 |
