双自杀基因CDTK对视网膜母细胞瘤杀伤作用的实验研究
张永红 唐罗生
中南大学湘雅医学院附二医院眼科410011，湖南长沙
摘要 目的 研究双自杀基因CDTK对视网膜母细胞瘤的杀伤作用。方法 1.构建载体pc-ChCDTK。2.将pc-ChCDTK载体转染Y79细胞株，通过RT-PCR、Western Blotting检测其在Y79细胞中的表达，设未转染对照组，加入不同浓度的5-Fc和GCV后观察抑瘤效应。3.用Y79细胞株建立RB裸鼠模型，将pc-ChCDTK质粒载体注入裸鼠玻璃体腔，设对照组，加入不同浓度的5-Fc和GCV后观察其杀伤作用。结果 1.成功构建载体pc-ChCDTK。2.自杀基因CDTK在Y79细胞中能够表达。未转染对照组加入5-Fc或GCV后平均活细胞比例随浓度增加而下降。载体转染组加入5-Fc或GCV后平均活细胞比例分别明显随浓度增加而下降。两组比较当5-FC浓度达到100ug/ml后各对应浓度组间均存在差异，当GCV浓度达到8ug/ml各对应浓度组间均存在差异。3。成功建立裸鼠RB模型，加入药物后60%的载体导入组在镜下未见明显肿瘤细胞，未导入组90%观察到明显的肿瘤细胞存在。结论 pc-ChCDTK载体能有效的杀伤视网膜母细胞瘤。
关键词 CDTK基因，视网膜母细胞瘤，pc-DNA3.1（-）载体，hTERT启动子，基因治疗
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